次日，朱德出面租下了位于南昌市中山路洗马池的江西大旅社，作为起义的总指挥部。由周恩来、李立三、恽代英、彭湃组成的中共前敌委员会决定7月31日晚举行武装起义，并详细研讨了起义事项。成立了以刘伯承为团长，周恩来、叶挺、贺龙为委员的参谋团，下设起义军总指挥部，由贺龙任总指挥，叶挺任前敌总指挥。确定起义方案后，周恩来亲自到第二十军军部拜访贺龙，向他阐明整个行动计划。
然而，当起义准备进行得如火如荼之际，张国焘却于7月29日接连发来两封密电，提出等他到达南昌后再决定是否起义。7月30日，抵达南昌的张国焘在前委紧急会议上要求推迟起义，遭到周恩来的严辞拒绝，周恩来甚至提出“如果我们现在不行动的话，我只好辞职！”在大多数人的坚持下，起义得以按计划举行。周恩来签发了绝密的作战命令：
“我军为达到解决南昌敌军之目的，决定于明早晨4时开始向城内外所驻敌军进攻，一举而歼之！”
朱德领受的却是一项特殊任务：设法拖住驻扎在南昌的第三军两个团的团长。
31日晚，朱德邀请第三军第二十三团团长卢泽明和第二十四团团长萧日文等人到城西街口的嘉宾楼参加宴会。凭借朱德在滇军的威望，两个团长不仅亲自出席，还带上了副官。宴会在觥筹交错中持续了两个多小时，之后又摊开了牌局。然而，情况发生了变化，贺龙部的一个营长突然跑来告密，两名团长即离席告辞。朱德立即将消息报告了周恩来，起义提前举行。
8月1日凌晨2时，南昌起义打响了。经过4个多小时的激战，黎明时分战斗结束。起义军歼敌3000余人，缴获枪支5000余支，子弹百万余发，大炮数门，占领了南昌城。
当天上午，成立了由宋庆龄、周恩来、贺龙、叶挺、朱德等25人组成的中国国民党革命委员会，通过了《八一起义宣言》等文件，同时对起义部队进行了整编，仍沿用国民革命军第二方面军番号。这也是周恩来和朱德的名字第一次同时出现在一个委员会的名单之中。
之后，蒋介石以重兵进攻南昌，起义部队于8月3日至6日先后撤离南昌，挥师南下。
到达广东三河坝后，周恩来决定起义军主力进击沿海的潮汕地区，以获得共产国际海运的援助，留第二十五师坚守三河坝，由朱德指挥。但起义军遭粤军和蒋介石中央军夹击，大败于汤坑。周恩来、刘伯承、贺龙、叶挺等主要负责人离队，或去香港，或去上海。朱德在三河坝得知南下部队失败后，遂率部向江西、广东交界处运动，经大庾整顿，开始了从正规战向游击战的转变，此时部队仅七八百人。后朱德得知滇军故交范石生部驻扎韶关，遂投奔范部。不久实情被敌军侦知，朱德部又移师湘南。1928年1月，朱德举行湘南起义，4月率部上井冈山，在宁冈砻市与毛泽东会师，建立红四军。
南昌起义是朱德和周恩来之间第一次真正意义上的合作。也正是因为此次合作，才有了后来的朱毛会师。
井冈山会师(1)
1927年中共中央“八七会议“后，毛泽东以特派员的身份到湖南组织起义，任秋收起义前敌委员会书记，卢德铭担任起义总指挥。毛泽东为了准备和组织秋收起义，奔走于萍乡、醴陵、浏阳、铜鼓之间，一路风餐露宿，穿山越溪，倍受艰辛。一次，他从安源去铜鼓的途中，在浏阳遇到民团盘查被扣留，那些民团奉命把他押到民团总部去处死。毛泽东贿赂民团不成，便设计逃跑，到离民团总部只有200米的地方，毛泽东不顾一切挣脱出来，拼命往田野里跑。最后跳到一个长满了嵩草的水塘中，一直躲到太阳落山，才算逃脱，当时那可是凶险至极。10年后，毛泽东在延安窑洞昏暗的油灯下，用不紧不慢的湘音向埃德加·斯诺讲述着这段经历，口气悠闲得如同掸掉一截烟灰。
这年9月9日，在毛泽东为首的前敌委员会的领导下，震撼湘赣的秋收起义爆发了，在“攻打长沙”口号的鼓动下，斗志昂扬的三路大军利剑直指长沙。但是，当时革命形势正处于低潮，敌强我弱，起义军大都又缺乏实战经验，应变措施不当，各路起义军相继失利。
在文家市里仁学校的一块草坪上，毛泽东主持召开前敌委员会。会上，大家围绕着部队何去何从的问题争吵不休。
第二天清晨，毛泽东这个穿着布衫、留着长发，身材瘦长的书生，率领一千多人马离开文家市，经萍乡向湘南转移。
谁都不会料到，这一去，便成就了一位天才的军事家。
与此同时，朱德正率南昌起义余部与国民党军队顽强抵抗。当他率2000人退出三河坝开往潮汕方向，行至饶平时，一个沉痛的消息传来：起义军主力在潮汕附近的乌石山全军覆没。
能脱离险境，保存力量就是最大的胜利。朱德咬紧牙关，率部稍事整顿，便经平和、永定、上杭一路急行军，向江西方向的山区开去。
此时，朱德的想法是先找一块根据地站稳脚跟，然后再图发展。这和一个月前秋收起义失利的毛泽东不谋而合。共同的选择使千里之外的两颗心在渐渐地靠近。
毛泽东率领队伍离开文家市后，开始向罗霄山脉中段进军。 9月29日，队伍来到了位于湘赣边界九陇山区的永新三湾。这里四周环抱着郁郁葱葱的山峦，是一个清秀、幽静的小山村。毛泽东主持召开了中共前敌委员会扩大会议，对部队进行改编。这便是历史上著名的三湾改编。
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